liczne siniaki na nogach

Zarówno proteazy ekspresyjne HAV i HCV, które degradują mitochondrialne przeciwwirusowe białko sygnalizacyjne (MAVS) i zawierający IFN-y indukujący adapter adaptor domeny TIR. (TRIF, znany również jako TICAM1), kluczowe cząsteczki adaptorowe dla receptora genu indukowalnego kwasem retinowym (I) podobnym do RIG-1 (RLR) i indukowanej przez TLR3 IFN typu I (14-17). Mimo to, w odróżnieniu od wątroby w ostrym zapaleniu wątroby typu A, ekspresja wewnątrzwątrobowa typu I ISG jest często silna zarówno w ostrym, jak i przewlekłym wirusowym zapaleniu wątroby typu C (12, 18. 20). Po części może to wynikać ze zdolności pDC do wykrywania komórek zakażonych HCV. pDC nie są stymulowane do produkcji IFN-y po inkubacji z wirionami HCV o wysokim mianie oczyszczonymi, ale są one aktywowane aktywnie przez TLR7, gdy są hodowane wspólnie z komórkami zakażonymi wirusem (21). Wynika to z przenoszenia exosomalnego HCV RNA z komórek zakażonych wirusem do pDC w procesie zależnym od składników komórkowego kompleksu endosomalnego sortowania wymaganego do transportu (ESCRT) (22). Ponieważ biogeneza cząstek eHAV jest również zależna od ESCRT (11), a wewnątrzwątrobowa obfitość RNA HAV jest większa niż HCV RNA o rząd wielkości w ostrym zakażeniu, pomimo znacznie niższych poziomów wewnątrzwątrobowych transkryptów ISG (12), scharakteryzować interakcje wirionów otoczkowych i nierozwiniętych ze świeżo wyizolowanymi ludzkimi pDC. Wyniki Komórki zakażone HAV, ale nie oczyszczone niezapowietrzone wiriony, stymulują ludzkie pDC do wytwarzania IFN-y. Wyizolowaliśmy BDCA4 + pDCs przez pozytywną selekcję z krwi zdrowych ludzkich dawców i scharakteryzowaliśmy odpowiedź pDC na HAV in vitro. pDC eksponowane na CpG-A (agonista TLR9) wytwarzały duże ilości IFN-y, ale wysokie stężenia nienaruszonych wirionów HAV nie powodowały stymulacji pDC ani w obecności, ani pod nieobecność przeciwciała przeciwapasydowego (Figura 1A). Brak IFN-y produkcja nie była spowodowana aktywną supresją pDC, ponieważ HAV nie miało wpływu na IFN-y wytwarzanie indukowane przez CpG-A, R848 (agonista TLR7) lub wirus grypy A (Figura 1B). Jednak pDCs wydzielają obfity IFN-y przy współhulturacji z komórkami wątrobiaka Huh-7.5 zakażonymi niskim pasażem, niecytopatycznym HAV (odnośnik 23 i Figura 1A). Wyniki te reprodukowano za pomocą pDC od wielu dawców (Figura 1C). pDCs były również aktywowane, gdy były hodowane wspólnie z zakażonymi płodowymi komórkami nerki małpy Rhesus (FRhK-4) (Figura 1C). Ani przeciwciało przypuszczalnego receptora komórkowego HAV, członek rodziny mucyny immunoglobuliny komórek T (TIM1, znany również jako HAVCR1) (24), ani neutralizujące przeciwciało anty-HAV nie blokowały tej odpowiedzi (Figura 1D), co sugeruje, że nie jest indukowane przez nierozwinięte. Wiriony HAV. Figura Kokulturowanie z komórkami zakażonymi HAV indukuje IFN-y produkcja przez pDCs. (A) pDC (4 x 105 / ml) eksponowano na niezasiedlone HAV (MOI = 20), z lub bez przeciwciała anty-HAV lub hodowano z komórkami zakażonymi wirusem HM175 / p16 (1 x 106 / ml). Supernatant IFN-. zmierzono 20 godzin metodą ELISA. Jako kontrolę pozytywną zastosowano DNA CpG (ODN2216, uM). LOD, granica wykrywalności. (B) pDC były narażone na wirusa grypy A (IAV, 6 jednostek HA / ml), R848 (1. M) lub CpG w obecności lub nieobecności HAV. (C) pDC od wielu dawców eksponowano na CpG lub HAV lub hodowano wspólnie z pozorowanymi lub zakażonymi HAV komórkami Huh-7.5 lub komórkami FRhK-4 przez 20 godzin. Czerwone paski wskazują medianę. (D) pDC i komórki zakażone HAV hodowano wspólnie w obecności monoklonalnego przeciwciała anty-HAV lub kontrolnej IgG, po traktowaniu bafilomycyną A (BAF, 50 nM) lub chlorochiną (CLQ, 50. M) lub 1. M TLR7 antagonista IRS-661 lub kontrolny IRS. Wyniki są reprezentatywne dla 2 niezależnych eksperymentów. (E) PBMC całkowite lub zubożone w PDC (-PR) poddano ekspozycji na 1. M CpG A lub hodowano wspólnie z pozorowanymi lub zakażonymi HAV komórkami Huh-7,5. (F) pDC współhodowano z komórkami zakażonymi przez większą liczbę dni
[podobne: objaw lasegue, objawy chłoniaka, objawy raka pluc ]