badania spirometryczne kraków

Najpierw ocenialiśmy, czy utrata Grhl3 zmienia odpowiedź na dawkę naskórka na IMQ. Zastosowanie 0,25% IMQ nie wykazało widocznego uszkodzenia skóry WT lub Grhl3 cKO w dniu 3, ale uderzająca różnica do dnia 6. Myszy WT wykazywały bardzo łagodną odpowiedź histologiczną na tę niską dawkę, z niejednolitym wzrostem KRT6 i bez oczywistej hiperplazji podczas gdy myszy Grhl3 cKO wykazywały zarówno wyraźną hiperplazję, jak i silną regulację w górę KRT6 (Figura 4, C i D). Podobnie, po 3 dniach traktowania przy 1% IMQ, nie było widocznej różnicy między myszami WT i Grhl3 cKO. Jednakże histologicznie występował nieco bardziej znaczący fenotyp u myszy Grhl3 cKO do dnia 6, z podobną regulacją w górę KRT6 (Figura 4, C i E). Gdy zastosowano standardową dawkę IMQ (5%), zaobserwowano podobne widoczne uszkodzenie, nasilenie zaburzenia bariery (TEWL) i uszkodzenie mikroskopowe (H & E) u myszy WT i Grhl3 cKO (Figura 4C i dodatkowa Figura 7, A i B) . Dodatkowo, zwiększoną infiltrację CD45 obserwowano w skórze Grhl3 cKO w dniu 6 z 0,25% traktowaniem IMQ (Figura 4F i Suplementowa Figura 7C). Figura 4 Utrata Grhl3 zwiększa podatność na patologię naskórkową za pośrednictwem układu immunologicznego. (A) ekspresja mRNA Grhl3 w naskórku po 4 dniach leczenia IMQ (WT I4) w porównaniu z dystalną skórą nieleczoną (WT dis) (n = 3). (B) y-Gal IH w myszach reporterowych Grhl3-Cre / LacZ po 3 dniach traktowania IMQ. Przerywana czerwona linia oznacza podstawową blaszkę. Oryginalne powiększenie, × 400. (C) H & E ze skóry WT i Grhl3 cKO w dniach 3 i 6 leczenia z 0,25%, 1% i 5% IMQ. Oryginalne powiększenie, × 400. (D) IHC KRT6 skóry WT i Grhl3 cKO w dniu 6 z 0,25% traktowania IMQ. Oryginalne powiększenie, × 400. (E) IHC KRT6 skóry WT i Grhl3 cKO w dniu 6 z 1% IMQ traktowania. Oryginalne powiększenie, × 400. (F) IH45 CD45 nacieku komórek skóry właściwej po 6 dniach leczenia IMQ 0,25%. Oryginalne powiększenie, × 400. Następnie ocenialiśmy, czy Grhl3 jest niezbędny do ustąpienia hiperplazji naskórka po standardowej dawce 5% IMQ. W 4 dni po zaprzestaniu stosowania IMQ nastąpiło wyraźne wyleczenie u myszy WT, ale kontynuowano hiperplazję u myszy Grhl3 cKO; po 12 dniach wyzdrowienia nie stwierdzono już wizualnych objawów uszkodzenia naskórka u myszy WT, w przeciwieństwie do ciągłego przerostu naskórka i silnego zabarwienia KRT6 u myszy GrKO3 cKO (Figura 5, A i B). Równoważne poziomy infiltracji CD45 obserwowano w skórze WT i Grhl3 cKO podczas wczesnego wyzdrowienia z 5% IMQ (Figura 5C i Suplementowa Figura 7C). Aby dodatkowo przetestować rolę Grhl3 w urazie z udziałem układu odpornościowego, przed zastosowaniem IMQ zastosowano leczenie anty-IL-22 w celu zablokowania odpowiedzi immunologicznej. Podczas gdy myszy WT reagowały na anty-IL-22, wykazując zmniejszoną odpowiedź na uszkodzenie i prawie normalną grubość naskórka, myszy Grhl3 cKO wykazywały minimalną poprawę (Figura 5D). Na podstawie tych obserwacji wnioskujemy (a), że wrażliwość na leczenie dawką IMQ o niskiej dawce jest zwiększona u myszy z delecją Grhl3 ze zwiększonym rozrostem naskórka i infiltracją komórek immunologicznych; (b) że Grhl3 jest wymagany do naprawy wywołanej IMQ naskórkowej patologii; i (c) utrata Grhl3 nadaje oporność na terapię anty-IL-22. Łącznie dane te dostarczają dowodów na regulowaną przez GRHL3 ścieżkę naprawy naskórka, która tłumi ciężkość choroby we współistniejącej z chorobami układu odpornościowego chorobie skóry. Figura 5 Grhl3 jest wymagany do gojenia zmian naskórkowych za pośrednictwem układu immunologicznego. (A) H & E ze skóry WT i Grhl3 cKO przed leczeniem i w dniu 4, 4 dzień powrotu do zdrowia i dzień 12 z odzysku 5% traktowania IMQ. Oryginalne powiększenie, × 200. (B) IHC KRT6 skóry WT i Grhl3 cKO w dniu odzyskiwania 12 z 5% traktowania IMQ. Oryginalne powiększenie, × 400. (C) Barwienie IH45 CDC nacieku komórek skóry immunologicznej w dniu 4 odzyskiwania po 5% traktowaniu IMQ
[patrz też: objawy raka pluc, objaw lasegue, objawy wirusa hiv ]